发布日期：2025/12/26

姜黄素光度法测定硼的具体步骤

姜黄素光度法测定硼的含量，其核心原理是硼在特定酸性条件下与姜黄素反应，生成一种名为玫瑰花菁苷的红色络合物，该络合物在特定波长（通常在540-550 nm）下的吸光度与硼的含量成正比，从而可以进行定量分析。以下是该方法的主要操作步骤概览，不同类型的样品前处理方式会有所不同：

一、样品准备
1、水样：清洁地面水或地下水可直接取样；浑浊水样需过滤；若硼含量过高，需预先稀释。
2、土壤样品：称取10.00克风干过筛的土样，按1:2的土水比例加水，连接冷凝管，文火煮沸5分钟，回流后过滤获取待测液。
3、钢铁/合金样品：样品需经酸溶解，并用磷酸和硫酸分解硼的化合物。对于成分复杂的样品，可能需采用甲醇蒸馏法使硼形成硼酸甲酯逸出，再吸收于氢氧化钙悬浮液中，以实现分离富集。

 

二、显色反应
此为方法关键步骤，需严格控制条件。
1、移取1.00 mL待测液于蒸发皿中，加入4.00 mL 姜黄素-草酸溶液（0.040g姜黄素与5.0g草酸溶于80mL 95%乙醇，加4.2mL浓盐酸，定容至100mL，需新鲜配制或冷藏保存）。
2、混匀后将蒸发皿置于 55°C ± 3°C的恒温水浴上蒸发至干。蒸干后继续在水浴上保留15分钟，使显色完全。

 

三、测定与计算
1、蒸发皿冷却至室温后，用移液管准确加入25.00 mL 95%的乙醇（土壤分析中加20.00 mL），用橡胶棒或聚乙烯棒搅拌，使红色络合物完全溶解。若溶液浑浊，需进行离心或干过滤。
2、将澄清液用20mm或10mm比色皿，于波长540nm（水样）或550nm（土壤、钢铁）处，以95%乙醇为参比，测定其吸光度。
硼含量（C）计算公式为：C = m / V。
其中 C为硼含量（mg/L 或 mg/kg），m为由校准曲线查得的硼质量（μg），V为所取试样体积（mL）或样品质量（g）。

 

四、校准曲线绘制
配制一系列已知浓度的硼标准溶液，与样品完全相同的步骤进行显色和测定，绘制吸光度-硼浓度（或硼量）的标准曲线。

 

五、关键注意事项
1、避免污染：所用器皿必须为无硼材料，如聚乙烯、石英或无硼玻璃。使用前用（1+3）盐酸浸泡2-4小时，用水冲洗干净。
2、控制实验条件：温度和时间对显色影响很大，务必严格控制水浴温度在55±3°C及保温时间。蒸发皿的形状、大小、厚度应尽量一致。
3、干扰的消除：
（1）高硬度水样：钙镁浓度超过100mg/L（以CaCO₃计）会产生干扰，可将显色后溶液离心分离，或使原水样通过强酸性阳离子交换树脂去除干扰。
（2）硝酸根：土壤中硝酸根含量超过20μg/g时干扰显色，可吸取滤液加饱和氢氧化钙溶液，蒸干后灼烧破坏硝酸根。
（3）铁离子：姜黄素对铁离子敏感，操作时避免接触铁制器皿。
（4）稳定性：乙醇溶解后的样品应及时测定，以免因乙醇挥发影响结果。若不能立即测定，应转入干燥具塞容器中。

 

六、方法性能指标
该方法精密度和准确度较好。例如，5个实验室测定含硼0.450 mg/L的水样，实验室内相对标准偏差为3.3%，实验室间为5.3%，回收率在91.8%至109%之间。