发布日期：2025/12/12

甲亚胺-H在土壤有效硼检测中的具体应用步骤和注意事项

 

甲亚胺-H（Azomethine-H）是检测土壤有效硼的一种常用分光光度法试剂。其核心在于能与硼特异性地生成黄色络合物，从而进行定量分析。以下是该方法的关键步骤、原理及需要注意的细节。

 

方法原理
在弱酸性环境（pH值约为5.6-5.8）下，土壤浸提液中的硼能与甲亚胺-H试剂发生反应，生成稳定的黄色络合物。该络合物在415纳米波长处有最大吸收峰，其颜色深度与硼的浓度在特定范围内（通常是0~1 μg/mL）符合朗伯-比尔定律，从而可以通过分光光度计进行定量测定。
为了得到准确的测量结果，需要排除铁、铝等金属离子以及有机质的干扰。通常在测定过程中会加入EDTA来络合铁、铝离子，并使用酸性高锰酸钾来消除有机质的颜色干扰。

 

操作步骤概要
以下是甲亚胺-H法测定土壤有效硼的主要操作流程。

1. 沸水提取​
称取10.00g风干土样（过2mm筛），加入20mL无硼水，在石英三角瓶中连接回流冷凝装置，文火煮沸并保持微沸5分钟，然后继续冷却回流5分钟。
2. 过滤澄清​
提取后加入少量硫酸镁溶液加速澄清，趁热过滤，滤液收集于塑料杯中。
3. 干扰净化​
吸取4.00mL滤液，依次加入酸性高锰酸钾溶液和抗坏血酸溶液。
4. 显色反应​
向净化后的溶液中加入5.00mL混合显色剂（甲亚胺溶液与缓冲液临用前按体积比3:2混合），摇匀后避光静置1小时。
5. 比色测定​
在415nm波长下，用2cm光径的比色皿，以空白试剂调零，测定溶液的吸光度。
6. 绘制标准曲线​
用硼标准溶液系列（例如0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 μg/mL）与样品同步处理并测定。

 

关键注意事项
要获得准确可靠的结果，以下这些细节需要特别留意：
1、试剂与器皿的“无硼”要求：整个实验过程必须使用石英或塑料器皿，避免普通玻璃器皿引入硼污染。配制试剂和浸提用的水也必须是无硼水。硼标准溶液应储存于塑料瓶中。
2、试剂配制与保存：甲亚胺溶液、酸性高锰酸钾溶液、抗坏血酸溶液以及混合显色剂都需要临用现配，不宜久存。甲亚胺试剂本身有颜色，其质量对结果影响很大，应选择颜色黄亮、无暗黄色杂质或黑色沉淀的优质产品。
3、显色过程的控制：显色反应完成后，建议整批样品在1小时内完成比色测定，因为吸光度可能随时间波动。对于低含量硼的样品（特别是在石灰性土壤中），将显色过程控制在避光、恒温（如25℃）​ 条件下进行，有助于提高稳定性。
4、质量控制措施：每批样品都需要重新绘制标准曲线并做空白试验。建议每10个样品做一个平行测定，以确保结果的精密度。例如，有效硼含量在0.5 mg/kg时，平行测定结果的绝对相差应不大于0.06 mg/kg。

 

结果计算与方法性能
土壤有效硼的含量通常以毫克/千克（mg/kg）表示，计算公式如下：
有效硼(B), mg/kg = (m₁ × D) / (m × 10³) × 1000
其中：
m₁是从标准曲线上查得的显色液中硼的质量（微克，μg）
D是分取倍数（本方法中为20/4=5）
m是土壤试样质量（克，g）
10³和 1000是单位换算系数

在严格控制的条件下，该方法具有良好的精密度和准确度。有验证报告显示，其方法检出限可低至0.0025 mg/kg，对同一样品多次测定的绝对误差很小，且对标准质控样的测定结果均在真值范围内。

 

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