发布日期：2025/03/19

实验室中常用的缓冲溶液在维持反应体系的pH稳定性方面起着关键作用，以下是一些常见的缓冲液及其特点和应用：

 

      1. 磷酸盐缓冲液（PBS、DPBS等）    

    组成：主要由磷酸二氢钠（NaH₂PO₄）和磷酸氢二钠（Na₂HPO₄）组成，部分含氯化钠（如PBS）或钙、镁离子（如DPBS）。  

    pH范围：6.2~8.2，常见pH 7.4。  

    应用：  

      PBS：用于细胞洗涤、免疫检测（如ELISA、流式细胞术）、组织运输等，因其等渗无毒特性。  

      DPBS：含Ca²⁺和Mg²⁺，适用于细胞培养、免疫染色等需要离子支持的场景。  

    注意事项：磷酸盐可能与金属离子形成沉淀，高温灭菌可能影响pH稳定性。

 

      2. Tris缓冲液（Tris HCl）    

    组成：三羟甲基氨基甲烷（Tris）与盐酸（HCl）调节pH。  

    pH范围：7.0~9.0，常用pH 8.0~8.6。  

    应用：  

      核酸实验：DNA/RNA提取、SDS PAGE电泳、碱性磷酸酶活性测定。  

      蛋白质纯化：维持中性至弱碱性环境，避免与金属离子反应。  

    注意事项：温度敏感（pH随温度变化明显），需现用现配。

 

      3. HEPES缓冲液    

    组成：4 羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）与NaOH调节pH。  

    pH范围：6.8~8.2，尤其适合细胞培养（pH 7.2~7.4）。  

    应用：  

      细胞培养：在无CO₂环境中稳定pH，如活细胞成像、免疫沉淀。  

      生物化学实验：电镜观察、抗原 抗体反应等。  

    优势：对细胞无毒，不干扰代谢过程。

 

      4. 醋酸缓冲液    

    组成：醋酸（CH₃COOH）与醋酸钠（CH₃COONa）。  

    pH范围：3.7~5.6，常用pH 4.0~5.0。  

    应用：  

      核酸纯化：DNA/RNA沉淀（乙醇 醋酸钠法）。  

      电泳染色：蛋白质结晶和凝胶染色。  

    特点：成本低、配制简单，但缓冲能力较弱。

 

      5. 柠檬酸盐缓冲液    

    组成：柠檬酸（C₆H₈O₇）与柠檬酸钠（Na₃C₆H₅O₇）。  

    pH范围：3.0~6.2，常用pH 4.7。  

    应用：  

      抗原修复：用于石蜡包埋组织切片的抗原解离。  

      RNA分离：破坏RNase活性，保持RNA完整性。  

 

      6. 碳酸盐 碳酸氢盐缓冲液    

    组成：碳酸钠（Na₂CO₃）与碳酸氢钠（NaHCO₃）。  

    pH范围：9.2~10.6，常用pH 10.0。  

    应用：  

      ELISA实验：包被抗体或抗原（如夹心法ELISA）。  

      酶偶联反应：在碱性条件下稳定蛋白质结构。  

 

      7. TAE/TBE缓冲液（核酸电泳专用）    

    组成：  

      TAE：Tris 乙酸 EDTA。  

      TBE：Tris 硼酸 EDTA。  

    pH范围：8.0~8.5。  

    应用：  

      琼脂糖电泳：TAE适用于大片段DNA分离，TBE适合小片段和高分辨率实验。  

    注意事项：TAE缓冲能力较弱，需及时更换。

 

      其他常见缓冲液    

    硼酸盐缓冲液  （pH 8.0~10.8）：用于眼药水配制或药物释放介质。  

    MES缓冲液  （pH 5.5~6.7）：适用于酶活性测定和低pH细胞实验。