发布日期:2025/03/12
生物染色剂的应用范围涵盖细胞学、组织学、微生物学等领域,以下是几种实验室常用生物染色剂的典型应用:
一、细胞核染色剂
1. 苏木素(Hematoxylin)
用途:核染色(结合伊红用于H&E染色)。
原理:与DNA结合,形成蓝紫色复合物。
应用:组织切片中细胞核显色(需媒染剂如明矾)。
2. 吉姆萨染液(Giemsa Stain)
用途:血涂片、疟原虫、染色体显带。
原理:天青 伊红复合物结合核酸,区分核与胞质。
特点:显示细胞核(紫色)、胞质(蓝色)及病原体。
3. 结晶紫(Crystal Violet)
用途:革兰氏染色(初染)、染色体压片。
原理:穿透细胞壁与核酸结合,革兰阳性菌保留紫色。
二、细胞质染色剂
1. 伊红(Eosin)
用途:胞质及胶原纤维染色(H&E中的“E”)。
原理:酸性染料结合碱性蛋白,呈粉红色。
应用:区分细胞质与核。
2. 亮绿(Light Green)
用途:植物细胞质染色(如与番红联用)。
特点:短暂染色后易褪色,需控制时间。
三、特殊结构染色剂
1. 碘液(Lugol's Iodine)
用途:淀粉检测(蓝黑色)、革兰氏染色媒染剂。
应用:植物细胞淀粉粒显色,细菌革兰染色辅助。
2. 番红O(Safranin O)
用途:革兰氏染色(复染)、植物木质化细胞壁。
特点:革兰阴性菌呈红色,与结晶紫对比鲜明。
3. 苏丹III/IV(Sudan III/IV)
用途:脂类染色(橙红色)。
原理:脂溶性染料溶于脂肪颗粒。
应用:脂肪细胞、细胞膜脂滴观察。
4. 刚果红(Congo Red)
用途:纤维素染色(蓝红色)、淀粉样蛋白检测。
特点:遇酸变蓝,用于植物细胞壁区分。
四、微生物专用染色剂
1. 抗酸染色剂(Ziehl Neelsen Stain)
成分:石碳酸品红(碱性品红+酚)。
用途:结核杆菌、麻风杆菌(抗酸菌呈红色)。
2. 墨汁负染(India Ink)
用途:隐球菌荚膜观察(背景黑色,荚膜透明)。
原理:染料不穿透细胞,凸显透明结构。
3. 乳酸酚棉蓝(Lactophenol Cotton Blue)
用途:真菌菌丝、孢子染色(蓝色)。
特点:兼具固定与染色功能。
五、荧光染色剂
1. DAPI(4',6 Diamidino 2 Phenylindole)
用途:DNA特异性荧光标记(蓝色荧光)。
应用:活细胞或固定细胞核定位。
2. 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)
用途:死细胞核染色(红色荧光)。
原理:不能穿透完整细胞膜,标记坏死细胞。
六、对比表格
染色剂 |
主要目标 |
颜色 |
典型应用场景 |
苏木素 |
细胞核 |
蓝紫色 |
组织切片H&E染色 |
伊红 |
细胞质 |
粉红色 |
与苏木素联用(H&E) |
吉姆萨 |
血细胞、病原体 |
紫/蓝色 |
疟原虫、染色体分析 |
结晶紫 |
革兰阳性菌 |
紫色 |
革兰氏染色初染步骤 |
苏丹III |
脂类 |
橙红色 |
脂肪细胞染色 |
DAPI |
DNA |
蓝色荧光 |
荧光显微镜核定位 |
注意事项
1. 毒性:部分染色剂有致癌风险,需戴手套操作。
2. 固定步骤:组织染色前需固定(如甲醛)防止结构破坏。
3. 脱色控制:革兰染色中乙醇脱色时间影响结果准确性。
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